La pelle, l’organo più grande del corpo, fornisce una barriera fisica passiva contro le infezioni e contiene elementi del sistema immunitario innato e adattivo.
La pelle è costituita da varie cellule, inclusi cheratinociti, fibroblasti, cellule endoteliali e cellule immunitarie. Questa diversità di tipi cellulari potrebbe essere importante per le terapie geniche perché la trasfezione del DNA potrebbe suscitare risposte diverse in diversi tipi cellulari.
Risposte cutanee e cellulari al rilascio di acido nucleico: lo studio
In precedenza è stata osservato la sovraregolazione e l’attivazione delle vie di rilevamento del DNA citosolico in diversi tipi di cellule non tumorali e tumorali, nonché nei tumori dopo l’elettroporazione (elettrotrasferimento) del DNA plasmidico (pDNA).
Sulla base di questa ricerca e dell’innata immunogenicità della pelle, sono stati correlati gli effetti dell’elettrotrasferimento del pDNA ai fibroblasti e ai cheratinociti sulla pelle del topo utilizzando la PCR in tempo reale della trascrizione inversa (RT-qPCR) e diversi tipi di quantificazione delle proteine.
Dopo l’elettrotrasferimento del pDNA, gli mRNA dei sensori di DNA putativi DEAD (AspGlu-Ala-Asp) box polipeptide 60 (Ddx60), assente nel melanoma 2 (Aim2), proteina legante Z-DNA 1 (Zbp1), gene 202 attivato dall’interferone (Ifi202) e la proteina 204 inducibile dall’interferone (Ifi204) erano sovraregolate nei cheratinociti, mentre Ddx60, Zbp1 e Ifi204 erano sovraregolate nei fibroblasti.
I livelli aumentati degli mRNA e delle proteine di diverse citochine e chemochine sono stati rilevati e variati in base al tipo di cellula.
Rilascio di acido nucleico e risposta immunitaria
Gli esperimenti sulla pelle del topo in vivo hanno confermato i risultati dello studio in vitro con una maggiore espressione di presunti mRNA del sensore del DNA e degli mRNA e delle proteine di diverse citochine e chemochine.
Infine, con la colorazione immunofluorescente è stato dimostrato che i cheratinociti cutanei, i fibroblasti e i macrofagi contribuiscono alla risposta immunitaria osservata dopo l’elettrotrasferimento del pDNA.
M. Bosnjak, K. Znidar, A Sales Conniff, T. Jesenko, B. Markelc, N. Semenova, J. Tur, K. Kohena, S. Kranjc Brezar, L. Heller, M. Cemazar; 2022 giu; 150:113088. doi: 10.1016/j.biopha.2022.11308812
